产品简介

ACK红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)也称ACK Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH4Cl。本产品经过滤除菌，经过ACK Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

储存条件：4℃,12个月有效；

操作步骤（仅供参考）：

（一）组织细胞样本

1.制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清；

2.裂解: 加入3～5倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min；本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作；

3.离心: 4℃，400～500g离心5min，弃红色上清，如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作；

4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各1次；

5.洗涤：根据实验要求加入适量溶液（PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液）重悬沉淀，4℃ 400～500g离心2～3min，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作，所加入的溶液（PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液）的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上；

6.如有必要，重复上述步骤5，共洗涤1～2次；

7.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。

(二)血液样本

1.取新鲜抗凝血，400～500g离心5min，弃上清；

2.裂解: 加入6～10倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～5min；本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作(特别提醒：对于鼠的血液，裂解1～2min已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4～5min，并且裂解过程中轻轻摇动以促进红细胞裂解)；

3.离心: 4℃ 400～500g离心5min，弃红色上清，如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作；  

4.如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各1次；

5.洗涤: 根据实验要求加入适量适量溶液（PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液）重悬沉淀。4℃ 400～500g离心2～3min，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作，所加入的溶液（PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液）的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上；

6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。

注意：对于微量或少量的血液样本，可以不用第1步操作，可直接加入10倍血液体积的ACK Lysis Buffer进行第2步操作，并在4℃或室温裂解4～15min；对于鼠的血液，裂解4～5min已经足够；对于人的外周血，宜延长裂解时间至10min，但通常不宜超过15min，并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。

注意事项

1.分装储存，防止污染；

2.因本品与抗生素有拮抗作用，因此不得与抗生素混用；

3.本产品仅供科研使用，请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途；

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。