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实验指南 | 跑核酸电泳,选琼脂糖还是PAGE?看完这篇不纠结

2026-06-05

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在分子生物学实验中,核酸电泳是最基础也最关键的检测手段之一。面对琼脂糖凝胶PAGE 凝胶,你真的选对了吗?两种凝胶体系看似相似,实则原理、分辨率、适用范围差异巨大。选错了,实验结果可能“白费功夫”。



01
两种凝胶的核心区别
琼脂糖凝胶

  •  基质天然海藻多糖,形成大孔径凝胶。

  •  原理:主要依靠孔径筛分效应,大分子迁移慢,小分子迁移快。

  •  优点:制备简单、操作快捷、韧性好,支持切胶回收。

  •  适用场景:快速检测、大片段 DNA 分离。

  

PAGE

   •  基质:聚丙烯酰胺,孔径极小且可调控。

   •  原理:结合分子筛效应与电荷效应,分辨率极高。

   •  优点:可区分1~10 bp 的微小差异。

   •  缺点:制胶繁琐、毒性风险、胶体脆、不易回收。

   •  适用场景:高精度分析、小片段核酸。




02
核心参数对比

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03
场景选择指南

首选琼脂糖凝胶 

    •  常规 PCR 产物检测(片段 > 200 bp)

    •  质粒抽提鉴定(超螺旋、线性、开环)

    •  基因组 DNA 或总 RNA 完整性检测

    •  酶切产物快速鉴定

    •  需要切胶回收的实验


首选 PAGE 凝胶

    •  引物、siRNA、miRNA 等小分子核酸

    •  SSR、AFLP 等高精度指纹分析

    •  单碱基差异检测(如突变分析)

    •  测序前片段筛选(如 NGS 文库质控)


04
实验小技巧

    •  琼脂糖凝胶:使用新鲜 TAE/TBE 缓冲液,避免反复加热导致凝胶浓度不均。

    •  PAGE 凝胶:注意丙烯酰胺完全聚合,上样量不宜过高(否则条带变形)。

    •  染色:Gel Red / Gel Green 灵敏度高,优于 EB。

    •  Marker 选择:务必匹配样本大小范围,避免“跑出胶”或“挤在底部”。



05
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