
在分子生物学实验中,核酸电泳是最基础也最关键的检测手段之一。面对琼脂糖凝胶和 PAGE 凝胶,你真的选对了吗?两种凝胶体系看似相似,实则原理、分辨率、适用范围差异巨大。选错了,实验结果可能“白费功夫”。
• 基质:天然海藻多糖,形成大孔径凝胶。
• 原理:主要依靠孔径筛分效应,大分子迁移慢,小分子迁移快。
• 优点:制备简单、操作快捷、韧性好,支持切胶回收。
• 适用场景:快速检测、大片段 DNA 分离。
• 基质:聚丙烯酰胺,孔径极小且可调控。
• 原理:结合分子筛效应与电荷效应,分辨率极高。
• 优点:可区分1~10 bp 的微小差异。
• 缺点:制胶繁琐、毒性风险、胶体脆、不易回收。
• 适用场景:高精度分析、小片段核酸。
首选琼脂糖凝胶
• 常规 PCR 产物检测(片段 > 200 bp)
• 质粒抽提鉴定(超螺旋、线性、开环)
• 基因组 DNA 或总 RNA 完整性检测
• 酶切产物快速鉴定
• 需要切胶回收的实验
首选 PAGE 凝胶
• 引物、siRNA、miRNA 等小分子核酸
• SSR、AFLP 等高精度指纹分析
• 单碱基差异检测(如突变分析)
• 测序前片段筛选(如 NGS 文库质控)
• 琼脂糖凝胶:使用新鲜 TAE/TBE 缓冲液,避免反复加热导致凝胶浓度不均。
• PAGE 凝胶:注意丙烯酰胺完全聚合,上样量不宜过高(否则条带变形)。
• 染色:Gel Red / Gel Green 灵敏度高,优于 EB。
• Marker 选择:务必匹配样本大小范围,避免“跑出胶”或“挤在底部”。
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📌 跑小片段核酸(比如100 bp 以下)时,你是选择高浓度琼脂糖还是直接上 PAGE?有没有踩过坑?
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