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超过50%的蛋白在大肠杆菌中表达形成成不溶性的包涵体。形成包涵体的蛋白通常是那些高度表达的蛋白。重新使包涵体具有生物活性结构是低成本获得足量样品的有效途径。万生昊天提供恢复靶蛋白质天然构象的复性服务。复性技术包括动态光散射(DLS)和其他引导复性进程的方法。

标准protocol
虽然有一些蛋白复性的基本的条件,但是每个蛋白的具体条件无法预测。各个蛋白的溶剂条件都不一样,包括盐,pH值,去污剂和各种添加剂。包括复性途径和复性速率的动力学过程也是至关重要的。不可能去也没必要去尝试所有条件的组合。多年来,经过大量的测试,我们发现了几个在复性中的关键因素。在此基础上,我们建立了一个标准的复性protocol。
对于复性项目,我们会首先尝试标准protocol的三种条件。迄今为止,我们已经成功复性了约65%的蛋白质。我们通过蛋白的溶解度判断复性效果。

定制protocol
经标准protocol处理仍无法复性的情况下,可进行定制服务,筛选18个复性条件。复性成功的样品会先寄小样给客户进行活性检测,并根据客户反馈扩大复性规模。也可以由我方进行活性检测。

复性分析
一般通过溶解性检测复性效果。如果一个蛋白能在溶液中保持稳定,复性就是成功的。但是很多复性后的蛋白仍然是无生物活性的。这有可能是因为蛋白形成了可溶性的寡聚体或者蛋白仍然处于展开/错误折叠构象。
如果必要,万生昊天将应用DLS(动态光散射)、分子排阻色谱法和圆二色谱分析复性蛋白。分析结果有助于恢复靶蛋白天然构象和生物功能。

报价
1,对于蛋白质复性项目,请给我们发电子邮件询价
2,对于已和我们签约的蛋白表达和纯化项目,如果蛋白在小试时不溶,我们会发给您一个复性的单独报价以及项目进展报告。

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